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中润浅谈PCR实验室被污染的原因有哪些?
发布者:中润官网 发布时间:2021-08-16 16:55 阅读:
PCR实验室又叫基因扩增实验室。能够通过DNA基因追踪系统来掌握患者体内的病毒含量。它最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是容易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。那么PCR实验室被污染的原因有哪些呢?
1、标本间交叉污染
标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染。标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染。有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。
2、PCR试剂的污染
主要是由于在PCR试剂配制过程中,由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。
3、PCR扩增产物污染
这是PCR反应中最主要最常见的污染问题,因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/mL),远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳性。
4、实验室中克隆质粒的污染
在分子生物学实验室及某些用克隆质粒做阳性对照的检验室,这个问题也比较常见。因为克隆质粒在单位容积内含量相当高,另外在纯化过程中需用较多的用具及试剂,而且在活细胞内的质粒,由于活细胞的生长繁殖的简便性及具有很强的生命力,其污染可能性也很大。
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